определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

Содержание

Определение количества гемоглобина по методу сали: принцип определения, как делать

определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

Стандартный анализ крови обязательно включает в себя показатель уровня гемоглобина. Такой анализ называется клиническим и является базой для исследования практически всех заболеваний. Белок гемоглобин находится в клетках крови – эритроцитах.

Он выполняет важную функцию клеточного дыхания. Благодаря железу, которое в нём содержится, кровь имеет красный цвет. Колориметрический принцип определения уровня гемоглобина основан именно на таком свойстве пигментации.

Как делать такой анализ предложил швейцарский врач Герман Сали (Herman Sahli) в конце 19 века.

Принцип проведения

Определение количества гемоглобина по методу Сали является классическим, его до сих пор используют во многих лабораториях. Гемоглобин – это сложный белок из группы гемопротеинов. Он состоит из двух компонентов: белкового глобина и небелкового гема.

Одна молекула гемоглобина содержит 4 гема. В центре каждого из них находится атом железа, который умеет обратимо соединяться с атомами кислорода и углекислого газа, при этом не окисляясь. Именно наличие этого элемента в крови придаёт ей характерный цвет.

На основе такого свойства гемоглобина Г. Сали изобрёл метод измерения его количества, который основан на определении цветового показателя крови.

В кислой среде глобин легко отделяется от гема, который начинает взаимодействовать с кислородом. Такая химическая реакция также меняет валентность железа и позволяет образовать новое вещество – гематин.

Его и используют для колориметрического анализа количества гемоглобина в крови по методу Сали.

Что представляет собой гемометр Сали

Для подсчёта уровня гемоглобина используют прибор, который изобрёл швейцарский диагност. Гемометр Сали состоит из трёх пробирок одинакового размера.

Две пробирки запаяны и наполнены раствором крови в соляной (хлороводородной) кислоте. Такая смесь носит название гематин и имеет коричневый оттенок. Интенсивность цвета зависит от количества гемоглобина.

В запаянных пробирках гемометра цвет соответствует стандарту содержания гемоглобина в крови здорового человека.

Третья пробирка имеет шкалу, на которой отмечены грамм-проценты и единицы гемометра. Эта ёмкость заполняется анализируемым материалом. Колориметрический анализ производится лаборантом визуально. Анализируемый гематин разбавляют водой до определённого цвета, который сравнивают со стандартным образцом.

Методика проведения

Для проведения лабораторного исследования крови по методу Сали осуществляют следующие действия. Пустую пробирку гемометра заполняют соляной кислотой до нижней отметки. Концентрация раствора должна составлять 0,1 Н. Далее специальным капилляром, который входит в комплект гемометра, набирают 0,02 мл крови пациента.

Капилляр опускают в кислотный раствор и аккуратно выпускают в него, забранный у пациента, материал. Кровь должна оказаться под слоем кислоты так, чтобы сама кислота осталась прозрачной. Далее содержимое пробирки перемешивают и выдерживают в нетронутом состоянии 5-15 минут. За это время произойдёт взаимодействие жидкостей, и образуется гематин коричневого цвета.

В образовавшееся вещество по капле добавляют дистиллированную воду, пока цвет не станет идентичным с цветом образца в запаянной пробирке гемометра. Каждый раз гематин размешивают стеклянной палочкой.

При этом жидкость поднимается, её уровень соответствует шкале контрольной пробирки. Как только цвет анализируемого материала сравняется со стандартным цветом, лаборант отмечает, какому делению шкалы грамм-процентов соответствует поднявшаяся жидкость.

Для перевода в необходимые граммы на литр полученную цифру умножают на 10.

Насколько точный метод определения гемоглобина

Швейцарский диагност изобрёл свой способ определения гемоглобина в крови в конце 19 века. На тот момент этот способ был самым точным.

Но новые исследования, открытия в области медицины и молекулярной диагностики создали новые методы. Появились аппаратные методики, которые исключают человеческий фактор при исследованиях.

Они способны оценивать биологический материал при помощи более точных замеров.

В связи с этим у метода Сали есть ряд недостатков, которые снижают точность измерения:

  1. Анализ цветного показателя гематина лаборант проводит визуально. Поэтому на точность влияет освещение в помещении, способность конкретного человека различать нюансы цветового спектра, особенности зрения лаборанта. Но даже здоровый человеческий глаз не может улавливать минимальные отклонения цвета, в отличие от высокоточной аппаратуры.
  2. Образцы в гемометре Сали со временем выцветают. Изменённый цвет стандарта даёт большую погрешность конечного результата.
  3. Превращение крови в гематин имеет разное время реакции. Определить конечный этап реакции невозможно, он колеблется от 2 до 40 минут и зависит от содержания в крови белков. Также оттенок может меняться и из-за разного количества билирубина.

Из-за указанных недостатков колориметрическое измерение по методу Сали имеет погрешность до 30%.

В феврале 2000 года был издан Приказ № 45 Министерства Здравоохранения РФ, в соответствии с которым смещение коэффициента показателя гемоглобина в крови не должно превышать 5%.

В связи с этим использование метода Сали на сегодняшний день не является пригодным для использования в клинико-диагностических лабораториях.

Отзывы

Мария

Сдавала анализ крови после гриппа. Делала в своей поликлинике по прописке. Результат поверг меня в настоящий шок – гемоглобин был сильно завышен относительно нормы. Решила пересдать кровь, только уже в платной лаборатории. Показатели оказались в норме. Администратор лаборатории объяснила, что метод Сали, который часто используют поликлиники, имеет погрешность.

Андрей

А мне в поликлинике сразу сказали, что используют недорогой метод Сали. Типа у него есть погрешности, но в пределах нормы, но можете и в другом месте сдать, если сомневаетесь. Почитал, этот метод вообще-то давно используется, и никогда проблем у людей не было. Не собираюсь переплачивать за анализы в платных лабораториях.

Светлана

Учусь на медика метод Сали, мы не раз тестировали в лабораториях. И доверия к нему мало, погрешность есть.

Если нужен тест на какое-то серьёзное заболевание, лучше проводить более высокоточное и современное обследование. Можно тоже колориметрическое обследование, но только гемиглобинцианидное.

Но вообще странно, сейчас метод Сали уже почти не используют, найти поликлинику с такой лабораторией сложно.

Несмотря на неточность результатов исследования и устаревшие способы их проведения, в некоторых лабораториях продолжают использовать метод Сали для определения содержания гемоглобина в крови. Такой способ является самым недорогим, быстрым и технически простым, но без сомнений влияет на точность результатов анализа.

Источник: https://sosud-ok.ru/krov/analiz/opredelenie-kontsentratsii-gemoglobina-metodom-sali.html

определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

гемоглобинакрови в нормеу взрослых: у мужчин 130-160 г/л; у женщин 120-140 г/л. Суточные вариации содержания гемоглобина в периферической крови достигают 15% с максимумом по утрам. У жителей северных регионов и высокогорных районов уровень гемоглобина нередко оказывается выше приведенных значений на 10 г/л.

У пожилых людей (старше 65 лет) нижняя граница нормы показателя достигает 122 г/л у мужчин и 110 г/л у женщин.Гемометр Сали представляет собой штатив и состоит из 3 пробирок одинакового диаметра. Одна (средняя) пробирка — пустая, две другие запаяны и содержат стандартный раствор солянокислого гематина определенной окраски.

Интенсивность окраски стандарта соответствует идеальной норме — содержанию гемоглобина 166,7 г/л (16,67 г%).

ЦЕЛЬ: освоить определение содержания гемоглобина по методу Сали.

ОСНАЩЕНИЕ:гемометр Сали; 0,1Н раствор хлористоводородной кислоты; дистиллированная вода, капилляр (0,02 мл) стеклянная палочка.

Определите концентрацию гемоглобина в образце крови, предлагаемой для исследования;

сделайте заключение о соответствии полученных вами данных нормативам.

3. Расчёт цветового показателя.

Цветовым показателем (ЦП)называютусловную величину, характеризующую степень насыщения гемоглобином каждого эритроцита. Этот показатель можно вычислить, зная содержание гемоглобина в исследуемой крови и количество эритроцитов в 1 мкл этой же крови.

ЦП = Нв (г/л) * 3 / (три первых цифры от числа эритроцитов)

В норме цветовой показатель равен 0,85 — 1,15 — нормохромазия.

Превышение ЦП верхнего предела нормы называют гиперхромазией, уменьшение за предел нижнего уровня нормы — гипохромазией.

ХОД РАБОТЫ:определив в исследуемой крови содержание гемоглобина и эритроцитов в 1 л крови, рассчитайте цветовой показатель, сопоставьте с показателями нормы.

4. Подсчёт лейкоцитов в камере Горяева.

Камера Горяева должна быть сухой и чистой. К ней притирают покровное стекло до появления радужных полос.

В смеситель (меланжер) для лейкоцитов (белая палочка в шарообразном расширении) до нижней метки «0,5» набирают кровь, а затем до метки «11» за шарообразным расширением 5% раствор уксусной кислоты, которая разрушает оболочки лейкоцитов (в камере подсчитывают их ядра), а кровь в меланжере разводится в 20 раз. Лейкоциты считаютв 100 больших квадратахсогласно правилу Егорова.Подсчёт производят по формуле:

Л=В*250*20*10 6 /100

где Л — количество лейкоцитов в 1 л крови; В — сумма лейкоцитов в 100 больших квадратов; 250 — множитель, приводящий к объёму крови 1 мкл (объём большого квадрата 1/250 мкл); 20 — разведение крови (кровь в меланжере разводится в 20 раз); 100 — число больших квадратов; 10 6 — количество мкл в одном литре.

В норме количество лейкоцитов 4-5 10 9 /л. Факторы, влияющие на количество лейкоцитов: возраст; время суток (нормальные биоритмы); приём пищи.

studopedia.org — Студопедия.Орг — 2014-2018 год. Студопедия не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования (0.002 с) .

Источник: studopedia.org

Определение концентрации гемоглобина

Важнейшие из методов определения концентрации гемоглобина — колориметрические. Они широко применяются на практике ввиду их простоты и доступности.

Гематитовый метод (метод Сали)

Основан на превращении гемоглобина при прибавлении к крови хлористо-водородной кислоты в хлоргемин (хлорид гематита) коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. Полученный раствор хлорида гематита разводят водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина.

Определение проводят в упрощенном колориметре — гемометре Сали. Этот прибор состоит из пластмассового штатива с 3 вертикальными гнездами. В боковых гнездах находятся 2 запаянные пробирки со стандартной жидкостью.

В среднее гнездо гемометра вставляют открытую сверху градуированную стеклянную пробирку того же диаметра, что и цветные стандарты. Градуированная пробирка имеет шкалу с делениями, показывающую количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови, т.е. в грамм-процентах (г%).

При гемометре имеются специальная пипетка для воды и стеклянная палочка для перемешивания.

В градуированную пробирку наливают до деления, помеченного цифрой «2 г%» (нижняя круговая метка) 0,1 г% раствор хлористо-водородной кислоты.

Затем набирают кровь в капиллярную пипетку до метки «0,02 мл», всасывая ее ртом через резиновую трубку (необходимо, чтобы столбик крови кончался точно на уровне метки и не разрывался пузырьками воздуха).

Обтерев кончик пипетки снаружи ватой, опускают ее в пробирку с 0,1 г% раствором хлористо-водородной кислоты и осторожно выдувают кровь. Повторными всасываниями и выдуваниями верхнего слоя жидкости пипетку ополаскивают. Пробирку несколько раз встряхивают и, заметив время, ставят в штатив.

Для полного превращения гемоглобина в хлорид гематита требуется не менее 5 мин. Через 5 мин гемометр поднимают до уровня глаз и сравнивают цвет испытуемой жидкости с цветом стандартов. Обычно (за исключением случаев крайне тяжелой анемии) он темнее, чем в стандартных пробирках.

С помощью неградуированной пипетки к испытуемому раствору добавляют по каплям дистиллированную воду, перемешивают стеклянной палочкой и сравнивают со стандартами. Как только цвет исследуемой жидкости станет одинаков с цветом стандартов, отмечают, какому делению шкалы соответствует уровень жидкости (по нижнему мениску) в пробирке.

Промышленность выпускает гемометры, содержащие грамм-процентную шкалу.

За идеальную норму принимают концентрацию гемоглобина в крови, равную 16,67 г%, или 166,7 г/л.

При соблюдении всех правил работы с гемометром у одного и того же больного при определении гемоглобина в разных порциях крови получают расхождение результатов в пределах ± 0,3 г% (3 г/л).

Цианметгемоглобиновый метод наиболее точен, принят в большинстве стран как стандартный.

Он основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива. Концентрацию цианметгемоглобина измеряют фотометрически. В качестве реактива употребляют раствор Драбкина (NaHCO3 — 1 г, KCN — 0,05 г, K3[Fe(CN)6] — 0,2 г, дистиллированной воды — до объема 1 л) или какой-нибудь другой с подобным действием.

Под влиянием железисто-синеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина (гемоглобина), который затем превращается при помощи цианина калия в цианметгемоглобин (гемоглобинцианид).

Наиболее употребительное разведение крови в реактиве Драбкина — 1 : 250 (0,02 мл крови и 5 мл реактива). Через 20 мин, необходимых для полного превращения гемоглобина в гемоглобинцианид, измеряют экстикцию при длине волны 540 нм и толщине слоя в 1 см против воды на спектрофотометре СФ-4 или на ФЭК-М и ему подобном фотоэлектроколориметре.

В настоящее время созданы прочные цианометгемоглобиновые стандарты в ампулах, соответствующие точно определенной концентрации гемоглобина.

Полученные растворы исследуют на фотоэлектроколориметре и вычерчивают калибровочную кривую, откладывая показатели оптической плотности со шкалы прибора (красные цифры барабана) на оси ординат, а концентрацию гемоглобина в граммах на литр на оси абсцисс.

На основании калибровочной кривой создают рабочую таблицу, указывающую, какая концентрация гемоглобина соответствует данному показанию ФЭК.

Существуют колориметры, специально разработанные для определения гемоглобина — гемоглобинометры. В большинстве из них используется цианметгемоглобиновый метод.

Гемоглобинометры могут работать независимо или в комплексе со счетчиками частиц. Так, гемоглобинометр «Культер» (Франция), который можно применять самостоятельно, дает прямые показания гемоглобина в граммах на 100 мл.

Прибор имеет высокую точность и воспроизводимость ± 0,1 г% (1 г/л).

Источник: www.medkurs.ru

Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали

В крови содержится в среднем 14 г % гемоглобина, у женщин — 12 — 15, у мужчин — 13 -16 г % (соответственно 120- 150 и 130- 160 г/л).

Определение количества гемоглобина имеет большое значение и является обязательным компонентом анализа крови. Гемоглобин определяется колориметрическими методами.

В настоящее время метод Сали в клинике применяется редко, так как существуют более точные методы с помощью фотоэлектроколориметров. Гемометр Сали используют в учебных целях.

Метод Сали основан на превращении гемоглобина в хлорид гематина коричневого цвета при добавлении к крови хлористоводородной кислоты.

Определение гемоглобина производят колориметрическим способом, основанным на следующем принципе: если исследуемый раствор путём разбавления довести до окраски, одинаковой со стандартным раствором, то концентрация растворённых веществ в обоих растворах будет совпадать, а количества веществ будут соотноситься как их объёмы. Зная количество гемоглобина в стандартном растворе (16,7 г%, что принято за 100% гемоглобина), легко вычислить его содержание в исследуемом растворе в относительных процентах.

Гемометр Сали представляет собой штатив, задняя стенка которого сделана из матового стекла. В штатив вставлены три пробирки одинакового диаметра. Две крайние запаяны и содержат раствор солянокислого гематина, средняя градуирована и открыта. Она предназначена для исследуемой крови. К прибору приложены капилляр (с меткой 20 мм3), стеклянная палочка и пипетка.

Цель работы: определить содержание гемоглобина в крови по методу Сали.

Оснащение: гемометр Сали, стерильный скарификатор, 0,1% раствор HCI, фильтровальная бумага, вата, спирт, эфир, йод, дистиллированная вода. Объект исследования — человек.

Проведение работы. В среднюю пробирку гемометра наливают раствор HCI до нижней кольцевой метки. Затем из пальца обычным способом набирают кровь в капилляр до метки, удаляя излишек с помощью фильтровальной бумаги. Выдувают кровь на дно средней пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетки, ополаскивают её соляной кислотой из верхнего слоя.

После этого содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по её дну, и оставляют стоять на 8-10 минут. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к раствору добавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор пока цвет полученного раствора не будет одинаков с цветом стандартного (добавляя воду, раствор перемешивают стеклянной палочкой).

Цифра, стоящая на уровне нижнего мениска полученного раствора, показывает содержание гемоглобина в граммах на 100 г исследуемой крови (при переводе в единицы СИ полученную цифру умножают на 10, получая величину гемоглобина в граммах на 1 л крови). Можно вычислить также относительное содержание гемоглобина в исследуемой крови.

Оформление протокола. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой крови. Вычислите относительное процентное содержание гемоглобина следующим образом. Допустим, количество гемоглобина в крови соответствует 14 делениям гемометра. Тогда по пропорции вычисляем относительное содержание гемоглобина в процентах. Сравните полученное значение с нормой.

Источник: studopedia.ru

Источник: https://mama-plus.ru/opredelenie-soderzhaniya-v-krovi-gemoglobina-po-metodu-sali/

Методы определения количества гемоглобина в крови — Физиология

определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

Свободный гемоглобин (Hb) – это белок, входящий в состав эритроцитов. его в плазме крови в норме составляет 1-4 мг/100 мл, или 0,16-0,62 мкмоль/л. Белок отвечает за газообмен в организме и поддержания правильного обмена веществ. Для слаженной работы всех систем организма уровень Hb должен оставаться стабильным.

Если красных клеток крови становится мало, то и концентрация Hb уменьшается, начинается кислородное голодание, нарушаются функции органов и их систем.

Как измеряют уровень гемоглобина?

Уровень гемоглобина обычно измеряется после забора образца крови для общего анализа.

Существует несколько вариантов измерения гемоглобина, большинство из которых в настоящее время выполняются автоматическими машинами, предназначенными для проведения различных анализов крови. Внутри таких автоматических приборов красные кровяные клетки разделяются, чтобы выделить молекулы гемоглобина в специальный раствор.

Свободный гемоглобин подвергается воздействию химического вещества, содержащего цианид, который связывается с молекулой гемоглобина с образованием цианметгемоглобина.

Далее раствор просвечивают светом и измеряют, сколько света поглощается (особенно на длине волны в 540 нанометров), таким образом определяется количество гемоглобина.

Виды свободного гемоглобина

Гемоглобин существует в нескольких формах. Его норма, в зависимости от вида, всегда различна. Отклонения того или иного вида Hb говорят о разных заболеваниях.

Существуют следующие подвиды свободного гемоглобина:

  • гликированый. Появляется при связывании его с глюкозой. Повышенный его уровень указывает на сахарный диабет. Норма составляет 4-6,5 %;
  • фетальный. Наличие этого белка в крови характерно для новорожденных. Норма для новорожденных – 80%.

После первого года жизни фетальный полностью заменяется на нормальный. Для взрослого человека уровень этого гемоглобина не должен превышать 1%. Увеличение показателей белка может говорит о серьезных заболеваниях.

Преимущества гемоглобинометра

Гемоглобинометр имеет ряд преимуществ, среди которых: наличие функции автоматической настройки калибровки (первоначальные параметры автокалибровки задают производители, они сохраняются на протяжении всей работы приспособления); длительность использования (устройство может работать без замены комплектующих в течение 5-6 лет); удобство в эксплуатации (небольшой, имеет красивый дизайн); легко чистится; есть возможность использовать стеклянные или одноразовые кюветы.

Гемоглобинометр является средством для измерения концентрации гемоглобина, его работу проверяют производители. При соблюдении указаний в инструкции и своевременном уходе за приспособлением, прибор будет работать безотказно минимум 5 лет.

Аппарат просто незаменим в салонах транспортных средств скорой помощи, а также экспресс-лабораториях, стационарных исследовательских центрах и обычных медицинских учреждениях. Он используется во время выезда на дом к больным людям. Его с собой берет медицинский работник с целью измерения уровня гемоглобина в крови пациента.

Если показатель не будет в пределах нормы, человеку следует обратиться к семейному доктору или терапевту.

Норма для детей

У детей уровень Hb зависит от возраста. На первом году жизни происходит физиологическое снижение белка в крови, что является нормой для новорожденных.

Чтобы поддерживать уровень Hb в крови ребенка в норме, педиатр может назначать анализ крови 1-2 раза в год. А дети, имеющие в анамнезе заболевания крови, должны сдавать анализы более 3 раз в год.

Концентрация Hb в крови ребенка зависит от его возраста:

Возраст ребенкаУровень Hb, г/л
Новорожденый (1-2 дня)140-220
3-6 мес.100-140
3-6 лет140
6-12 лет160

Внимание! Нехватка Hb в детском организме может привести к задержке умственного и физического развития. Именно поэтому очень важно регулярно следить за уровнем Hb в первые месяцы жизни.

В крови содержится в среднем 14 г % гемоглобина, у женщин — 12 — 15, у мужчин — 13 -16 г % (соответственно 120- 150 и 130- 160 г/л).

Определение количества гемоглобина имеет большое значение и является обязательным компонентом анализа крови. Гемоглобин определяется колориметрическими методами.

В настоящее время метод Сали в клинике применяется редко, так как существуют более точные методы с помощью фотоэлектроколориметров. Гемометр Сали используют в учебных целях.

Метод Сали основан на превращении гемоглобина в хлорид гематина коричневого цвета при добавлении к крови хлористоводородной кислоты.

Определение гемоглобина производят колориметрическим способом, основанным на следующем принципе: если исследуемый раствор путём разбавления довести до окраски, одинаковой со стандартным раствором, то концентрация растворённых веществ в обоих растворах будет совпадать, а количества веществ будут соотноситься как их объёмы. Зная количество гемоглобина в стандартном растворе (16,7 г%, что принято за 100% гемоглобина), легко вычислить его содержание в исследуемом растворе в относительных процентах.

Гемометр Сали представляет собой штатив, задняя стенка которого сделана из матового стекла. В штатив вставлены три пробирки одинакового диаметра. Две крайние запаяны и содержат раствор солянокислого гематина, средняя градуирована и открыта. Она предназначена для исследуемой крови. К прибору приложены капилляр (с меткой 20 мм3), стеклянная палочка и пипетка.

Цель работы: определить содержание гемоглобина в крови по методу Сали.

Оснащение: гемометр Сали, стерильный скарификатор, 0,1% раствор HCI, фильтровальная бумага, вата, спирт, эфир, йод, дистиллированная вода. Объект исследования — человек.

Проведение работы. В среднюю пробирку гемометра наливают раствор HCI до нижней кольцевой метки. Затем из пальца обычным способом набирают кровь в капилляр до метки, удаляя излишек с помощью фильтровальной бумаги. Выдувают кровь на дно средней пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетки, ополаскивают её соляной кислотой из верхнего слоя.

После этого содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по её дну, и оставляют стоять на 8-10 минут. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Затем к раствору добавляют по каплям дистиллированную воду до тех пор пока цвет полученного раствора не будет одинаков с цветом стандартного (добавляя воду, раствор перемешивают стеклянной палочкой).

Цифра, стоящая на уровне нижнего мениска полученного раствора, показывает содержание гемоглобина в граммах на 100 г исследуемой крови (при переводе в единицы СИ полученную цифру умножают на 10, получая величину гемоглобина в граммах на 1 л крови). Можно вычислить также относительное содержание гемоглобина в исследуемой крови.

Оформление протокола. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой крови. Вычислите относительное процентное содержание гемоглобина следующим образом. Допустим, количество гемоглобина в крови соответствует 14 делениям гемометра. Тогда по пропорции вычисляем относительное содержание гемоглобина в процентах. Сравните полученное значение с нормой.

16,7 г % — 100 %

14,0 г % — х

х =(100-14,0)/16,7

Норма у женщин

Для женщин, не занимающих тяжёлой физической работой, норма гемоглобина составляет от 120 до 150 г/л. Данные показатели могут меняться в период менструации и снижаться до 110-115 г/л.

Концентрация гемоглобина во время беременности снижается. Это происходит, потому что кровь разжижается, увеличиваются ее объемы. Поэтому, колебания уровня железосодержащего белка во время беременности считается нормой.

Уровень Hb беременных зависит от триместра:

  • в первом и третьем триместре нижняя граница нормы – 110 г/л;
  • во втором триместре – 105 г/л.

Кроме того, в течение всей беременности уровень Hb не должен превышать 140 г/л.

Что такое талассемия?

Талассемия — это группа наследственных факторов, влияющих на количество гемоглобина. Неспособность организма вырабатывать необходимое количество молекул глобулина приводит к тому, что организм начинает компенсировать недостачу другими менее совместимыми молекулами глобулина.

Различные виды талассемии определяются по типу недостающей молекулы глобулина. Серьезность этого заболевания зависит от типа недостающей глобулиновой цепи, количества дефицитных глобулинов и степени дефицита.

В легкой форме это заболевание проявляется в виде легкой анемии, тогда как более тяжелое течение заболевания может быть несовместимо с жизнью.

Норма для мужчин

Показатели Hb у мужчин выше женских из-за действия гормона тестостерона и больших физических нагрузок. В норме у мужчин от 18 до 60 лет уровень Hb колеблется – 130-170 г/л.

Источник: https://MedBur.ru/krov/metod-izmereniya-gemoglobina-v-krovi.html

Определение гемоглобина в крови – методы диагностики, строение и физиология гемоглобина

определение содержания в крови гемоглобина по методу сали

Общеклинический анализ крови – это первоочередное исследование, назначаемое больным при поступлении в муниципальные или частные клиники. Любые патологические изменения со стороны различных органов отражаются на составе крови.

Общеклинический анализ исследует количественные и качественные свойства красных форменных элементов и содержание в них белка гемоглобина. Квантитативное (количественное) определение гемоглобина в крови – важная составляющая работы лабораторных сотрудников, направленная на своевременное выявление анемии.

Красные форменные клетки вырабатываются (с помощью животных белков, железа и витаминов) в красном костном мозге и разрушаются под действием ферментов селезенки.

Они выполняют жизненно важные функции – транспорт кислорода к тканям и утилизацию оксидов углерода. Повышенный или пониженный гемоглобин указывает на  патологии органов различной этиологии.

В предложенном ниже видео показан процесс переноса оксидов.

Строение и физиология гемоглобина

Гемоглобин – это четвертичная глобула, которая занимается утилизацией и поставкой оксидов в организме человека. Данное пептидное соединение является тетрамером, состоящим из четырех субъединиц. Одна полипептидная структура способна переносить через кровоток до четырех молекул кислорода.

Гемоглобин состоит из простетической группы и глобулина. Простетическую группу железосодержащего пептида принято называть «гемом». Благодаря гему кровь приобретает свойственный ей окрас – алый или синевато-красный. Простетическая группа содержит железо, которое участвует в восстановительно-окислительных процессах.

Различают несколько основных видов гемоглобина:

  • Оксигемоглобин,
  • Карбоксигемоглобин,
  • Дезоксигемоглобин,

Оксигемоглобин образуется при присоединении кислорода к гемоглобину в условиях высокого парциального давления. При отщеплении кислорода от железосодержащего белка образуется устойчивая форма – дезоксигемоглобин.

Карбоксигемоглобин появляется в результате присоединения монооксида или диоксида углерода.

Стоит отметить, что монооксид углерода в 250 раз эффективнее связывается с железосодержащим белком, чем обуславливается его опасность для жизни при вдыхании (угарный газ).

Дезоксигемоглобин сильно токсичен для тканей человеческого организма, поэтому существуют специальные системы «ликвидации» гемоглобина в крови. Этим занимается особое пептидное соединение – гаптоглобин.

Определение количества гемоглобина по методу Сали

Метод базируется на свойстве железосодержащего белка превращаться в хлорид гематита под действием соляной кислоты. Методика Сали считается неинвазивным вмешательством.

Интенсивность цвета жидкости прямо пропорциональна концентрации гемоглобина в крови. Раствор хлоргемина при проведении исследования разводят дистиллированной водой до стандартного цветового спектра.

Важно! Стоит отметить, что гемоглобин по Сали не получил широкого распространения на территории РФ.

Метод, который применяется для определения уровня гемоглобина, принято называть «гемометром Сали». Другое название современного метода определения гемоглобина по Сали – гемоглобинометрия. Такой колориметрический аппарат состоит из специального штатива, который имеет три гнезда.

Боковые гнезда держат две склянки с веществами. Среднее гнездо данного прибора необходимо для размещения пронумерованной мензурки из стекла.

Градуированная мензурка обладает шкалой с делениями, которые измеряют количество железосодержащего пептидного соединения в граммах на децилитр (г/дл).

При клиническом исследовании крови используется специальная пипетка для воды и размешивания содержимого склянки.

При проведении полного анализа по методу Сали вначале в склянку наливается 0.10% раствор соляной кислоты. Потом выполняется забор исследовательского материала из кончика пальца в пипетку до отметки «0.04 мл». Впоследствии пипетку обтирают стерилизованной ваткой и размещают в мензурку с раствором HCl.

Медицинский сотрудник несколько раз встряхнет содержимое пробирки и поставит отстаиваться. Полное химическое превращение железосодержащего пептидного соединения в растворе соляной кислоты происходит не менее чем за 10-15 минут.

По истечении пяти минут оценивается цвет жидкости в гемометре со стандартными цветами. Как правило, он более темный, нежели в стандартных пробирках.

Используя обычную пипетку к раствору постепенно добавляют чистую воду, попеременно перемешивая содержимое и сравнивая со стандартным цветом. На окончательном этапе цвет материала должен сравняться с нормативом.

После всего вышеперечисленного замеряют уровень жидкости и проводят соответствующие подсчеты.

В промышленном масштабе выпускаются гемометры, которые содержат исключительно грамм-процентную градуированную шкалу. Нормой гемоглобина у мужчин и женщин принято считать значения 15 г%, или 168 г/дл. Но даже при соблюдении определенных правил наблюдаются небольшие погрешности в измерениях. В некоторых случаях разные результаты могут в значительной мере исказить данные о болезни.

Цианметгемоглобиновый метод определения содержания гемоглобина в крови

Стандартизированным и наиболее точным методом определения гемоглобина принято считать гемоглобинцианидный анализ. Такая методика базируется на свойстве железосодержащего пептидного соединения превращаться в цианметгемоглобин при добавлении к биологическому материалу определенного вещества.

цианметгемоглобина замеряют фотометрически. При анализе крови в роли реактива применяется раствор Драбкина. Железосодержащий белок под влиянием синеродисто-железистого калия превращается в метгемоглобин, который потом преобразуется в присутствии цианина калия в гемиглобинцианид.

Типичное соотношение разведения биологического материала с реагентом — 2 : 500 (0,04 миллилитров капель крови и 10 мл реактива).

По истечении 30 минут, которые нужны для полного преобразования железосодержащего пептида в гемиглобинцианид, измеряют «гашение» при длине волны в 550 нанометров и плюс толщине слоя в 2 см против воды на спектрофотометре СФ или на ФЭК и ему похожей технике. С помощью СФ также измеряют уровень свободного железосодержащего пептида в плазме.

На данный момент разработаны гемиглобинцианидные цветовые стандарты в ампулах, которые точно соответствуют определенному уровню железосодержащего белка. Растворы, полученные в результате определенных реакций, исследуют с помощью колориметрии. После всего рисуют рабочие таблицы и узнают, какое количество железосодержащего пептидного соединения содержится в кровотоке.

Есть устройства, специально созданные для определения количества гемоглобина. Зачастую используются именно циангемоглобиновые методы определения гемоглобина.

Как правило, гемоглобинометрические приборы могут работать самостоятельно. Широкое применение такие тест-устройства для определения гемоглобина в крови получили в домашних условиях.

Однако в ряде ситуаций больные не учитывают влияние внешних факторов в доме (стресса, еды).

Другой набор методов диагностики уровня гемоглобина в крови

Значительную известность и распространение среди различных лабораторий получила методика гемихром (или гемихромный метод). Принцип данного метода основан на преобразовании всех форм железосодержащего пептида в гемихром, который имеет красноватый цвет. Преимущество гемихромного метода заключается в том, что он не является токсичным.

Иногда назначают прохождение биохимического исследования на гликированный гемоглобин. Стоит отметить, что важное значение гликозилированный гемоглобин и глюкометр имеют при диагностике сахарного диабета.

При определенных состояниях в моче может содержаться гемоглобин, поэтому нередко данная биологическая жидкость и ее анализы являются важными частями диагностики различных заболеваний. Такое случается при переливании несовместимой крови от донора, в особенности у ребенка.

Загрузка…

Источник: https://dlja-pohudenija.ru/serdcze/gemoglobin/osobennosti-opredeleniya-gemoglobina-v-krovi-osnovnye-metody-diagnostiki-i-lecheniya-patologicheskih-sostoyanij

Определение количества гемоглобина по методу сали

Метод определения концентрации гемоглобина по Сали практически не используется в современных лабораториях. Он требует больших временных затрат и дает неточные результаты. Но метод Сали все еще эффективен в условиях ограниченного доступа к современной технике. Например, при отсутствии электроэнергии, расходных материалов или при поломке автоматического исследовательского оборудования.

Принцип проведения исследования

В основе метода Сали лежит простая реакция преобразования гемоглобина. Для этого в препарат крови добавляется определенное количество хлористоводородной кислоты. В результате в пробирке образуется вещество хлоргематин, коричневого цвета.

Определить содержание преобразованного гемоглобина можно по интенсивности окраса полученной смеси. Для этого раствор разбавляется дистиллированной водой, пока его оттенок не станет идентичным веществу в контрольной запаянной пробирке.

Со временем содержимое контрольных препаратов выцветает. В результате может быть отклонение полученных данных от реальных показателей на 1-3%.

Гемометр Сали для определения уровня гемоглобина

Чтобы упростить проведение лабораторного анализа был разработан гемометр Сали, который включает:

  • штатив с 3 вертикальными гнездами;
  • 2 запаянные пробирки со стандартными жидкостями;
  • открытую градуированную пробирку;
  • капилляр (0,2 мл);
  • пипетку для воды;
  • стеклянную палочку для перемешивания.

В стандартном растворе содержится норма в 167 г/л. После разбавления препарата крови, смешанного с кислотой, дистиллированной водой, достаточно сравнить разницу в объеме жидкости, чтобы высчитать уровень гемоглобина у пациента по методу Сали.

Методика проведения анализа

Для определения содержания гемоглобина в крови лаборант наливает в пробирку 0,1% раствор соляной кислоты до нижней круговой отметки. Затем из пальца пациента забирается 0,04 мл крови и добавляется под прозрачный кислотный слой. Содержимое перемешивается и отставляется на четверть часа. Это время необходимо, чтобы гемоглобин преобразовался в хлоргематин.

По истечении 15 минут лаборант сравнивает цвет с контрольной пробиркой. Если у пациента не наблюдается анемии 3 степени, то полученный раствор окажется темнее. Затем с помощью пипетки по каплям добавляется дистиллированная вода. Каждый раз раствор перемешивается стеклянной палочкой.

Как только цвет сравняется, остается посмотреть на уровень жидкости по нижнему мениску. Учитывая, что стандартная пробирка гемометра Сали градуирована в г/%, для получения стандартной величины в г/л необходимо результат умножить на 10.

Источник: https://fitnespozitiv.ru/opredelenie-soderzhaniya-v-krovi-gemoglobina-po-metodu-sali/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.